聚合酶链反应（PCR，Polymerase Chain Reaction）是由Kary Mullis博士于20世纪80年代开发的一项革命性技术。它因能够快速、准确地识别特定DNA序列并合成大量副本，被誉为“分子复印机”。目前已经衍生出多种基于原始PCR方法的技术，广泛应用于分子生物学和生物医学领域。

### 实时定量PCR（qPCR）

实时PCR，亦称为定量PCR（qPCR），将PCR的扩增与检测整合在一个步骤中。其主要通过荧光探针（如插层染料或水解探针）来测量PCR产物的数量。这项技术广泛用于病原体检测和DNA序列的拷贝数分析。与传统PCR相比，qPCR的优势在于实时监测反应进程，并提供精确的定量分析，使得在研究基因表达或诊断中更为高效。

### 逆转录PCR（RT-PCR）

逆转录PCR（RT-PCR）技术则利用RNA作为模板，生成互补DNA（cDNA）。通过逆转录酶将RNA转化为cDNA，再通过DNA聚合酶进行扩增。此技术被广泛应用于检测基因表达的动态变化，尤其是在基因调控研究和疾病诊断中。此外，RT-PCR也帮助我们在RNA-Seq实验中进行质量控制。

### 逆转录定量实时PCR（RT-qPCR）

RT-qPCR结合了RT-PCR和qPCR的优势，快速测量RNA水平并监测基因表达变化。这项技术适用于评估抑制剂、激活剂和小干扰RNA（siRNA）对基因表达的影响，并常用于确认RNA-Seq实验后的表达变化。

### 数字PCR（ddPCR）

数字PCR（ddPCR）是一种通过微流控芯片分段流体的方法，将样本隔离为数万个液滴，可视作独立的PCR反应室。相比qPCR，ddPCR具有更高的精确度和更低的变异系数，尤其在进行单细胞RNA测序时，有助于获取高质量的数据。

### 结束语

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