在生物医疗检测中,样本内的内源性抗体类物质(如RF、HAMA、异嗜性抗体等)可能会干扰检测过程,从而导致错误的临床检测结果。为了有效消除这些干扰,降低假阳性和假阴性的发生率,提高检测系统的准确性、灵敏度和稳定性,建议在检测过程中主动添加适当的阻断剂。
主动阻断剂含有对干扰抗体具有高亲和力的成分,能够主动与干扰抗体结合,从而阻断其与检测抗体或捕获抗体的结合。相对而言,被动阻断剂通常为动物IgG,通过竞争结合干扰抗体实现降低干扰的目的,需使用较高的浓度以增强竞争力。此外,复合型阻断剂则通过化学交联的方式将单体IgG交联成大分子聚合物,利用空间位阻效应提升阻断效果。
在使用IgG/RF吸附剂时,它能与血清中的IgG形成免疫复合物,利用其结构类似于变性IgG的特性来吸附RF,从而显著提高IgM检测的灵敏度和特异性。
阻断剂使用建议
1. 阻断剂的最终工作浓度应通过梯度实验确定,首次使用时建议从较高浓度开始,确认有效后再逐步稀释至更低浓度,以选定更合适且经济的使用浓度。
2. 使用阻断剂的原则是尽可能早与样本接触,且延长作用时间。
3. 对于免疫侧向层析法,建议将阻断剂加入标记物垫或样品垫处理液中;对于酶免试剂盒或化学发光试剂盒,建议加入磁珠液或酶标液中;免疫比浊产品则建议加入R1工作液中。
4. 在条件允许的情况下,建议测试多种阻断剂,以寻找最合适的产品;由于检测对象及系统存在差异,当单一阻断剂的效果无法完全满足需求时,建议尝试组合使用。实验结果表明,协同组合可呈现更佳效果。
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