本试剂盒专为科学研究而设计,禁止用于医学诊断。微量转铁蛋白(MTF)Elisa试剂盒的检测原理采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。在预先包被adropin(AD)抗体的微孔中,依次加入样本、标准品及HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底清洗后,使用TMB底物显色。在过氧化物酶的催化下,TMB转化为蓝色,再在酸的作用下变为最终的黄色。颜色深浅与样品中adropin(AD)的浓度呈正相关。通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),以此计算样品浓度。
样品的收集、处理及保存方法如下:
1. 血清:使用无热原和内毒素的试管,操作中避免任何细胞刺激。收集血液后,3000转离心10分钟,迅速小心地分离血清与红细胞。
2. 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝剂,3000转离心30分钟,取上清。
3. 细胞上清液:在3000转离心10分钟后去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织用适量生理盐水捣碎,然后3000转离心10分钟,取上清。
5. 保存:若样本在收集后不能立即检测,请按一次用量分装并冷冻于-20℃,以避免反复冻融。样品在室温下解冻时,确保其均匀充分解冻。
操作注意事项:所用的试剂盒包括标准品(S0-S5),其浓度依次为:0、25、50、100、200、400pg/mL。
试剂的准备:20×洗涤缓冲液需按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。
洗板方法的具体操作步骤,以及结果判断包括绘制标准曲线:在Excel中,以标准品浓度为横坐标,对应OD值为纵坐标,绘制标准品的线性回归曲线,依据曲线方程计算各样本的浓度值。
人生就是博-尊龙凯时对本试剂盒的性能声明及免责声明指出,所有使用该试剂盒进行的研究需在科学范围内进行,确保结果的准确性及可靠性。